小鼠白介素6(il-6)elisa試劑盒基于雙位點(diǎn)的雙抗夾心ELISA方法定量檢測(cè)樣品中IL-6的含量。IL-6特異性的抗體已經(jīng)預(yù)包被在96孔板上。標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的目標(biāo)蛋白與固定化的抗體結(jié)合,移除未結(jié)合的底物后,加入目標(biāo)蛋白特異性的生物素化的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)洗滌,向反應(yīng)孔中加入的鏈霉親和素-HRP偶聯(lián)物。洗滌移除所有未結(jié)合的鏈霉親和素-HRP試劑,加入HRP底物溶液,產(chǎn)生有色產(chǎn)物,顏色的深淺與目標(biāo)蛋白的的含量成正比。
實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定樣品指標(biāo)水平。樣品包括血清血漿尿液腦脊液細(xì)胞固體組織等,用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入樣品,再與HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品濃度呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中濃度,或者與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本陰陽(yáng)性。
白介素6(IL-6)是主要由巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生,具有多種復(fù)雜生理功能的多肽類細(xì)胞因子。在機(jī)體發(fā)生炎癥反應(yīng)或感染時(shí),病毒、內(nèi)毒素、腫瘤壞死因子等多種細(xì)胞因子可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生IL-6。IL-6生物學(xué)作用主要體現(xiàn)在誘導(dǎo)B細(xì)胞分化產(chǎn)生免疫球蛋白,促進(jìn)T細(xì)胞增殖生長(zhǎng),增強(qiáng)血細(xì)胞的分化及其抗瘤效應(yīng),促進(jìn)骨髓造血干細(xì)胞增殖等。
IL-6是細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)中的重要成員,在急性炎癥反應(yīng)中處于中心地位,IL-6產(chǎn)生后誘導(dǎo)產(chǎn)生C反應(yīng)蛋白(CRP)和降鈣素原(PCT)生成,與炎癥性疾病及感染程度直接相關(guān)。IL-6能更快的診斷早期炎癥及預(yù)警膿毒癥的發(fā)生。另外,IL-6半衰期要短于CRP和PCT,能更快的反應(yīng)抗生素治療的效果,更好的反應(yīng)患者的預(yù)后。
小鼠白介素6(il-6)elisa試劑盒特點(diǎn):
1、靈敏度高;
2、金標(biāo)準(zhǔn)的抗體對(duì)以及蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品,實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性好;
3、比色法檢測(cè)方法,無(wú)放射性;
4、優(yōu)化的標(biāo)準(zhǔn)雙抗夾心ELISA實(shí)驗(yàn),標(biāo)準(zhǔn)的工作時(shí)間為3-5小時(shí);
5、適用樣品:細(xì)胞培養(yǎng)上清液,血清,血漿,其它生物液體。